sábado, 17 de octubre de 2015

DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS EN DIFERENTES MATRICES

RESUMEN

El próximo documento es el resultado de laboratorio realizado el día 08 de Octubre de 2015, como práctica de Bioquímica del programa de Ingeniería Ambiental de la Universidad de Cundinamarca sede Girardot. En esta práctica se reconoció la extracción de lípidos por medio del método Soxleth.

INTRODUCCIÓN 

El método de extracción Soxhlet para la determinación de grasas y aceites es aplicable para determinar lípidos biológicos, hidrocarburos ya sea fracciones pesadas o relativamente polares del petróleo y cuando los niveles de grasas no volátiles pueden alterar el límite de solubilidad del solvente. El método es aplicable en aguas residuales o afluentes tratados que contengan estos materiales, aunque la complejidad de la muestra puede producir resultados desviados a causa de la falta de especificidad

Los jabones metálicos solubles son hidrolizados por acidificación. Sólo los aceites y las grasas sólidas o viscosas presentes se separan de la muestra líquida por filtración sobre una matriz sólida absorbente. Después de la extracción en un aparato soxhlet con solvente orgánico, se pesa el residuo que queda de la evaporación del solvente para determinar el contenido en grasa y aceite. 

En la determinación de grasas y aceites no se mide una cantidad absoluta de una sustancia específica; se determinan grupos de sustancias con características físicas similares con base en su solubilidad en el solvente. Así, el término "grasas y aceites" comprende cualquier material recuperado como una sustancia soluble en el solvente (n-hexano). 

METODOLOGÍA
Para este laboratorio fueron dos los procedimientos para la extracción de lípidos. El primero se realizó mediante el método de Soxleth, primero se pesó 5 o 10 gr de leche en polvo y también el papel filtro, luego de pesar el papel filtro se dobló en forma de cono, se incorporó la muestra, luego se colocó la muestra con el papel filtro en el tubo de extracción y se adicionaron 300 ml de éter de petróleo o benceno al matraz, luego de 2 horas se extrajo la muestra con solvente, después de que se completara la extracción se recuperó la muestra con destilación simple, durante 30 minutos se dejó secar el matraz y después se peso, por último de se extrajo y se dejó secar el residuo y pesarlo para finalmente hacer los cálculos para determinar el porcentaje de materia grasa.
Con el método de Bligh Dyer se determinó la humedad de la muestra para poder mantener la relación de cloroformo, metanol y agua, luego se pesaron 10 gr de la pasta homogénea para después agregar 10 ml de de cloroformo y 20 ml de metanol y se agitó por 10 minutos; después se agregaron nuevamente 10 ml de cloroformo y se homogenizó por 10 minutos, luego se volvieron a agregar 10 ml de agua y agitó por otros 10 minutos, después se dejó reposar la mezcla y luego se observó la separación de las dos fases, posteriormente se retiró la capa metanol agua con un poco de la capa clorofórmica, en seguida se pipeteó 10 ml de la capa clorofórmica y se evaporó a 40°C, luego se llevó a la estufa a 105° por 1 hora, por último se enfrío y se pesó, se repitió el mismo proceso hasta que se obtuvo un peso constante .

RESULTADO Y ANÁLISIS 
  
CONCLUSIÓN

  • Observamos el proceso de extracción de lípidos por método Soxleth.
  • Usamos distintos métodos de extracción de lípidos en el laboratorio de Bioquímica vegetal, de una manera simple, con el fin de extraer grasas (lípidos) de las diferentes harinas.
  • Observamos cada uno de ellos según su clasificación de harina dando como resultados diferentes porcentajes de rendimiento y diferentes concentraciones de grasas.

ANEXOS 







  EXTRACCIÓN DE CARBOHIDRATOS POR MÉTODO CUALITATIVO CON DIFERENTES REACTIVOS




RESUMEN

El siguiente informe es el resultado de laboratorio realizado el 01 de octubre del presente año, como práctica de la asignatura de Bioquímica del programa de Ingeniería Ambiental de la Universidad de Cundinamarca sede Girardot. En dicha práctica se observaron azucares reductores, no reductores y monosacáridos.

INTRODUCCIÓN

Sabiendo que los carbohidratos también llamados “hidratos de carbono” son constituyentes de los tres principales grupos químicos que forman la materia orgánica junto con las grasas y proteínas, se llevó acabo la identificación de carbohidratos lo cual lo hace referencia a los cambios que se dieron en cada una de las muestras de fructosa, sacarosa y almidón. Carbohidratos con los que se trabajó con ayuda de la adición de otras sustancias que reaccionaron, y así pudimos observar cómo fueron esos cambios e identificar los tipos de carbohidratos a los que pertenecían cada uno de los elementos

Por medio de este informe daremos a conocer los cambios que se dieron en las sustancias al ser mezcladas con (almidón), fruta dulce (fructosa), y el azúcar (sacarosa), haciendo referencia a estos como fuentes de carbohidratos; y luego al aplicarles otros elementos reactivos como el lugol , fehling a y b, reactivo de Seliwanoff y  reactivo de Molish que permitieron identificar y comprobar los principales tipos de carbohidratos al que pertenecían cada una de las mezclas, si fueron monosacáridos o polisacáridos , y así verificar si fueron positivos o negativos para cada uno; teniendo en cuenta los colores que se adquirieron en una de las muestras y cuando fueron expuestas al calor con el baño de maría 

METODOLOGÍA

Para este laboratorio fueron varios los procedimientos a realizar para el reconocimiento de los carbohidratos y su clasificación. Para identificar si la lactosa, sacarosa, glucosa y la fructosa eran azúcares reductores o no se uso el reactivo Fehling, con 3 mL de cada una de las muestras y 1 mL de Fehling A y B, después se calentó al baño María, luego observar los resultados. Después se uso el lugol para reconocer los polisacáridos, se agregó 3 mL del glúcido, unas gotas del Lugol y observar lo obtenido. Con el reactivo de Molisch se colocó 2 mL de cada muestra, con 3 gotas de dicho reactivo y por último se agregó 2 mL de ácido sulfúrico y finalmente mirar si en la reacción hay presencia de carbohidratos reductores o no. Para determinar si había presencia de cetohexosas se usó el reactivo de Seliwanoff, se cogieron 5 mL de este reactivo y 3 mL de cada muestra, se calentó por 4 minutos a baño María, la coloración 8 rojo cereza deteminaba que la muestra era positiva. Con el reactivo de Bial se podía evidenciar si existían pentosas en las muestras (sacarosa,lactosa,glucosa y fructosa), colocando 2 ml de cada una de ellas y 4 ml del reactivo de Bial, luego colocandolo a baño María durante 10 o 15 minutos y observar si el resultado era positivo o no. Por último para estudiar los azúcares no reductores se tomó una muestra de sacarosa y 10 gotas de ácido clorhídrico, se calentó por unos minutos y determinar si se logró romper el enlace O-glucosídico. 

RESULTADO Y ANÁLISIS / ANEXOS 







Limón
Reacciona
Bebida hidratante
No reacciono
Gaseosa
Reacciona
lactosa
Reacciona
Sacarosa
Reacciona
glucosa
Reacciona          
fructosa
Reacciona






Limón
Negativo
Bebida hidratante
negativo
Gaseosa
positivo
lactosa
positivo
Sacarosa
positivo
glucosa
positivo              
fructosa
negativo




Limón
Negativo
Bebida hidratante
Negativo
Gaseosa
Negativo
lactosa
negativo
Sacarosa
positivo
glucosa
negativo
fructosa
negativo
CONCLUSIONES
  1. Observamos cualitativa mente un carbohidrato a través de reacciones químicas específicas.
  2. Usamos distintos reactivos con el fin de reconocer cada uno de ellos según su clasificación atómica, esto es un método cualitativo de extracción de carbohidratos.
  3. Observamos cada uno de ellos según su clasificación  por número de átomos de carbono triosas, tetrosas, pentosas, hexosas y heptosas.
  4. Diferenciamos la Sacarosa (azúcar común), Fructosa (refresco), Lactosa (leche), Almidón (harina) en cada uno de los reactivos dando positivos por su cambio de color ya que es un prueba cualitativa