RESUMEN
El siguiente informe es el resultado de laboratorio realizado el 27 de agosto del presente año, como práctica de laboratorio de la asignatura de bioquímica de ingeniería ambiental de la UDEC.
En dicha práctica se observó la extracción de ácidos nucleicos de frutas como el banano y la fresa y lograr entender las teorías que hay sobre el ADN, las células y la biología molecular.
Los ácidos desoxirribonucleicos (ADN) y ribonucleico (ARN) son polímeros de nucleótidos formados por una azúcar de cinco carbones (desoxirribosa en el ADN y ribosa en el ARN), una base nitrogenada (que puede ser adenina, timina, citosina, guanina y uracilo) y una molécula de fosfato.
La expresión de los genes es la base del metabolismo celular, y por esta se entiende que el ADN se transcribe en ARN, que a su vez se traduce en proteínas. esta secuencia ADN-ARN- proteína constituye el dogma central de la biología molecular.
Los estudios contemporáneos de ecología molecular se han esforzado en entender las funciones metabólicas de los diferentes componentes biológicos presentes en el ambiente y conocer la diversidad biológica mediante el uso y aplicación de técnicas moleculares basadas en la amplificación de diversas regiones del ADN y ARN. La detención de la expresión de los genes o la presencia de ARN específicos nos permitirá acercarnos a temas como el impacto de los diferentes componentes físicos del ambiente en la expresión del ADN (ya que la simple presencia de ADN no nos indica la actividad de los genes), así como a la regulación metabólica de los enzimas que son esenciales en el papel ecológico que juegan los organismos dentro de su ecosistema ( ciclos bioquímicos, biorremedaión reciclaje de nutrientes), entre otros.
En la extracción de ácidos nucleicos, existen diferentes métodos que periten su obtención partiendo de diferentes fuentes por ejemplo; platas plasmáticos, gotas de sangre, cabellos, células bacterianas o eucariotas, etc. El método de extracción para la purificación de ADN depende de la aplicación del anterior.
en esta practica utilizaremos diferentes frutas. El procedimiento se fundamenta en lisis celular por medios mecánicos y químicos, liberación del ácido nucleico.
METODOLOGÍA
Para este laboratorio fueron tres los procedimientos realizados, en la primera parte se preparó la solución amortiguadora con 6 ml de detergente y 4 ml de agua destilada. Segunda parte se maceró las fresas hasta obtener una consistencia blanda, se mezcló 50 ml de la solución amortiguadora y se dejó reposar por 10 minutos; luego en un tubo de ensayo se añadió la mezcla preparada anteriormente después se agregó 6 ml de alcohol etílico por la pared del tubo de ensayo para evitar que se me mezclaran, se dejó reposar y más tarde se observó una mancha blanca (ADN de la fresa). Y en la tercera parte se practicó el mismo procedimiento de la fresa pero esta vez con el banano.
RESULTADO Y ANÁLISIS
En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN para esto utilizamos La solución de detergente y sal es capas de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear de la célula de la fresa. . 2º.- Los iones salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de la célula. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y se habrá separado de él por acción del detergente. La sal evita la unión de las proteínas al ADN. 3º.- El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. frio El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales se quedan en la solución acuosa. 4º.- El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realizaría añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN. 5 el azul de metileno es un colorante básico de formula molecular: C16H18Cl N3S permite distinguir ciertas zonas de la muestra, En este caso vamos a teñir el ADN de la fresa y el banano para si poder distinguirlos y así poder observarlos.
CONCLUSIÓN
Según lo visto en laboratorio podemos concluir que la forma mas casera y fácil
de poder identificar el ADN dos frutas es la propuesta en clase.
También se puede decir que utilizando una solución amortiguadora podemos
ver el cambio de color y se identifica claramente el ADN de las frutas.
ANEXOS
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